TGuide FFPE DNA ชุดขั้นตอนเดียว

A-1 ความเข้มข้นต่ำของเซลล์หรือไวรัสในตัวอย่างเริ่มต้น — เพิ่มความเข้มข้นของเซลล์หรือไวรัส

A-2 การแยกตัวอย่างไม่เพียงพอ — ตัวอย่างไม่ได้ถูกผสมอย่างทั่วถึงกับบัฟเฟอร์ lysis แนะนำให้ผสมให้ละเอียดโดยการปั่นด้วยคลื่นชีพจร 1-2 ครั้ง —การสลายเซลล์ไม่เพียงพอที่เกิดจากกิจกรรมการลดลงของโปรตีเอสเค —การสลายเซลล์หรือการเสื่อมสภาพของโปรตีนไม่เพียงพอเนื่องจากเวลาอาบน้ำอุ่นไม่เพียงพอ แนะนำให้ตัดเนื้อเยื่อเป็นชิ้นเล็ก ๆ และยืดเวลาอาบน้ำเพื่อขจัดสิ่งตกค้างทั้งหมดในไลเซท

A-3 การดูดซับ DNA ไม่เพียงพอ —ไม่มีการเติมเอทานอลหรือเปอร์เซ็นต์ต่ำแทนเอทานอล 100% ก่อนที่ไลเซทจะถูกถ่ายโอนไปยังคอลัมน์ปั่น

A-4 ค่า pH ของบัฟเฟอร์การชะต่ำเกินไป —ปรับ pH ให้อยู่ระหว่าง 8.0-8.3

เอทานอลตกค้างในตัวชะ

—มีบัฟเฟอร์สำหรับล้างตกค้าง PW ในตัวชะ เอทานอลสามารถขจัดออกได้โดยการปั่นแยกแกนหมุนเป็นเวลา 3-5 นาที แล้ววางที่อุณหภูมิห้องหรือตู้อบ 50℃ เป็นเวลา 1-2 นาที

A-1 ตัวอย่างไม่สด —แยก DNA ตัวอย่างที่เป็นบวกเพื่อควบคุมเพื่อตรวจสอบว่า DNA ในตัวอย่างเสื่อมโทรมหรือไม่

A-2 การเตรียมการล่วงหน้าที่ไม่เหมาะสม —เกิดจากการบดไนโตรเจนเหลวมากเกินไป ความชื้นกลับคืนมา หรือมีตัวอย่างมากเกินไป

การปรับสภาพควรแตกต่างกันไปตามตัวอย่างต่างๆ สำหรับตัวอย่างพืช ต้องแน่ใจว่าได้บดไนโตรเจนเหลวอย่างทั่วถึง สำหรับตัวอย่างสัตว์ ให้ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันหรือบดให้ละเอียดในไนโตรเจนเหลว สำหรับตัวอย่างที่มีผนังเซลล์ที่แตกยาก เช่น แบคทีเรีย G+ และยีสต์ แนะนำให้ใช้ไลโซไซม์ ไลติเคส หรือวิธีการทางกลเพื่อทำลายผนังเซลล์

4992201/4992202 Plant Genomic DNA Kit ใช้วิธีการแบบคอลัมน์ซึ่งต้องใช้คลอโรฟอร์มในการสกัด เหมาะอย่างยิ่งสำหรับตัวอย่างพืชต่างๆ รวมทั้งผงแห้งของพืช Hi-DNAsecure Plant Kit เป็นแบบคอลัมน์เช่นกัน แต่ไม่ต้องการการสกัดฟีนอล/คลอโรฟอร์ม ทำให้ปลอดภัยและปลอดสารพิษ เหมาะสำหรับพืชที่มีพอลิแซ็กคาไรด์และโพลีฟีนอลสูง 4992709/4992710 DNAquick Plant System ใช้วิธีการที่ใช้ของเหลว ไม่จำเป็นต้องสกัดฟีนอล/คลอโรฟอร์มเช่นกัน ขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์นั้นง่ายและรวดเร็วโดยไม่จำกัดจำนวนเริ่มต้นของตัวอย่าง ดังนั้นผู้ใช้จึงสามารถปรับปริมาณได้อย่างยืดหยุ่นตามความต้องการในการทดลอง สามารถรับชิ้นส่วน gDNA ขนาดใหญ่ได้โดยให้ผลผลิตสูง

จีโนม DNA ถูกสกัดจากตัวอย่างเลือดครบส่วนของมนุษย์ในปริมาณต่างๆ โดย TIANamp Blood DNA Kit ผลลัพธ์มีดังนี้ ผลลัพธ์จะแสดงเป็นข้อมูลอ้างอิงเท่านั้น ผลการสกัดจริงขึ้นอยู่กับเงื่อนไขของตัวอย่าง

การสกัดดีเอ็นเอของก้อนเลือดสามารถทำได้โดยใช้รีเอเจนต์ที่มีให้ในชุดทั้งสองนี้ โดยเพียงแค่เปลี่ยนโปรโตคอลเป็นคำแนะนำเฉพาะสำหรับการสกัดดีเอ็นเอของก้อนเลือด สามารถออกสำเนาแบบอ่อนของโปรโตคอลการสกัดดีเอ็นเอของก้อนเลือดได้เมื่อมีการร้องขอ

ระงับตัวอย่างสดด้วย PBS 1 มล. น้ำเกลือปกติ หรือบัฟเฟอร์ TE ทำให้ตัวอย่างเป็นเนื้อเดียวกันโดยสมบูรณ์ด้วยเครื่องทำให้เป็นเนื้อเดียวกันและรวบรวมตะกอนที่ก้นหลอดโดยการปั่นแยก กำจัดส่วนลอยเหนือตะกอน และระงับตะกอนอีกครั้งด้วยบัฟเฟอร์ 200 ไมโครลิตร GA การทำให้บริสุทธิ์ของ DNA ต่อไปนี้สามารถทำได้ตามคำแนะนำ

สำหรับการทำให้บริสุทธิ์ของ gDNA ในตัวอย่างพลาสมา เซรั่ม และของเหลวในร่างกาย ขอแนะนำให้ใช้ TIANamp Micro DNA Kit สำหรับการทำให้บริสุทธิ์ของไวรัส gDNA จากตัวอย่างซีรัม/พลาสมา ขอแนะนำให้ใช้ TIANamp Virus DNA/RNA Kit สำหรับการทำให้บริสุทธิ์ของแบคทีเรีย gDNA จากตัวอย่างซีรัมและพลาสมา แนะนำให้ใช้ TIANamp Bacteria DNA Kit (ควรรวมไลโซไซม์สำหรับแบคทีเรียที่เป็นบวก) สำหรับตัวอย่างน้ำลาย ขอแนะนำให้ใช้ Hi-Swab DNA Kit และ TIANamp Bacteria DNA Kit

แนะนำให้ใช้ DNAsecure Plant Kit หรือ DNAquick Plant System สำหรับการสกัดจีโนมของเชื้อรา สำหรับการสกัดจีโนมยีสต์ แนะนำให้ใช้ TIANamp Yeast DNA Kit (ควรเตรียมไลติเคสด้วยตัวเอง)